TFIIF RAP 74 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405237-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TFIIF RAP 74O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TFIIF RAP 74 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TFIIF RAP 74 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GTF2F1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TFIIF RAP 74 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405237-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TFIIF RAP 74 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405237-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GTF2F1 codifica a TFIIF RAP 74, uma subunidade central do fator geral de transcrição IIF, que coopera com a RNA polimerase II para sustentar a formação do complexo de pré-iniciação, a liberação do promotor (promoter escape) e a elongação inicial. Em coordenação com TFIIB, TFIIE e TFIIH, a TFIIF ajuda a modular o uso do sítio de início da transcrição e influencia programas transcricionais em todo o genoma ligados ao controle do ciclo celular e à expressão gênica responsiva ao estresse. A disrupção de redes de fatores de transcrição da Pol II, incluindo componentes da TFIIF, é frequentemente estudada no contexto de desregulação transcricional, estresse replicativo e proteostase alterada observados em diversos modelos de doença. Assim, GTF2F1 é um nó útil para investigar dependências da maquinaria de transcrição e seus efeitos a jusante sobre a organização da cromatina e vias de sinalização.
TFIIF RAP 74 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GTF2F1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GTF2F1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GTF2F1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GTF2F1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.