TEF-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423328

概要

Tead3 は TEF-5 をコードしており、TEF-5 は TEA/ATTS ドメインをもつ転写因子として、YAP/TAZ などの共活性化因子と協調し、エンハンサー駆動型の遺伝子発現プログラムを制御することで、細胞増殖・生存・系譜（ラインエージ）決定を調節します。マウスでは、TEF-5 は Hippo 経路のシグナルを文脈依存的な転写出力へと統合し、発生過程のパターニングや臓器成長に寄与します。TEAD ファミリーの活性はメカノトランスダクションや幹／前駆細胞状態と広く関連しているため、Tead3 は成長制御および組織恒常性の研究における重要なノードとなります。TEAD–YAP/TAZ の転写回路の破綻は、複数のモデル系で腫瘍形成様の表現型や異常な再生と関連づけられており、経路研究や疾患機序研究への応用を支持します。

TEF-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTead3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tead3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tead3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TEF-5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TEF-5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tead3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TEF-5の機能に不可欠なTead3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tead3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TEF-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTEF-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tead3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TEF-5 HDRプラスミド（m）および TEF-5 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTead3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTead3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。