TBK1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-425191-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TBK1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TBK1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase TBK1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Tbk1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TBK1 Anticorpo (A-6): sc-398366
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TBK1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-425191-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TBK1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-425191-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Tbk1** do camundongo codifica a **TANK-binding kinase 1 (TBK1)**, uma quinase de serina/treonina que integra sinais de imunidade inata e de estresse ao fosforilar **IRF3/IRF7** e modular programas transcricionais ligados ao **NF-κB**. A TBK1 atua a jusante de vias de receptores de reconhecimento de padrões, incluindo **cGAS–STING** e **RIG-I/MAVS**, para induzir respostas de **interferon tipo I** e a defesa antiviral, e também se conecta à **autofagia seletiva** e à **mitofagia** por meio de proteínas adaptadoras como **OPTN** e **SQSTM1**. Além da defesa do hospedeiro, a sinalização de TBK1 influencia a homeostase metabólica e redes de sinalização inflamatória frequentemente estudadas em modelos de neuroinflamação e neurodegeneração. A atividade ou a dosagem desregulada de TBK1 tem sido associada a fenótipos relacionados à imunidade e à neurodegeneração, tornando **Tbk1** um nó central para estudos mecanísticos em células de camundongo.
TBK1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tbk1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tbk1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tbk1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tbk1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.