TAZ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400320-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TAZO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TAZ (h) e o Plasmídeo Double Nickase TAZ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para WWTR1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TAZ Anticorpo (1F1): sc-293183
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TAZ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400320-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TAZ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400320-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
WWTR1 codifica o coativador transcricional TAZ (TAZ/WWTR1), um importante efetor a jusante da via de sinalização Hippo que integra sinais mecânicos, polaridade celular e entradas de GPCR para regular programas de expressão gênica que controlam proliferação, sobrevivência, diferenciação e plasticidade epitélio–mesênquima. O TAZ transita entre o citoplasma e o núcleo em resposta à fosforilação mediada por LATS1/2, associando-se a fatores de transcrição da família TEAD para modular alvos envolvidos no crescimento tecidual e na remodelação da matriz extracelular. A atividade desregulada de TAZ tem sido associada à inibição por contato alterada e a estados transcricionais aberrantes do tipo célula-tronco, tornando WWTR1 um alvo frequentemente investigado em estudos de biologia do câncer, sinalização associada à fibrose e desenvolvimento de órgãos. Sua interação cruzada com as vias Wnt/β-catenina, TGF-β/SMAD e de mecanotransdução reforça ainda mais sua relevância para dissecar o controle transcricional dependente do contexto.
TAZ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus WWTR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de WWTR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função WWTR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com WWTR1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.