非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
TAZCRISPR激活质粒(m): sc-430168-ACT
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- TAZ CRISPER激活质粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- TAZ CRISPR 激活质粒 (m)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 TAZ CRISPR 激活质粒 (m) 和 TAZ CRISPR 激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别针对 Wwtr1 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：TAZ: sc-518026，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
TAZCRISPR激活质粒(m) | sc-430168-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
TAZCRISPR激活质粒(m2) | sc-430168-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
小鼠 Wwtr1 编码转录共激活因子 TAZ（WWTR1）。TAZ 是 Hippo 信号通路的关键效应分子，可将机械刺激与细胞极性信息连接到基因表达程序，从而调控细胞增殖、生存以及谱系决定。TAZ 会根据 LATS1/2 介导的磷酸化在细胞质与细胞核之间穿梭，并整合来自 GPCR、WNT/β-连环蛋白以及细胞骨架张力等信号，进而调节 TEAD 依赖的转录。在发育与组织稳态过程中，Wwtr1 参与器官大小控制、再生以及干/祖细胞行为；而在实验模型中，TAZ 活性失调与异常生长、与纤维化相关的转录程序以及致癌表型相关。这些功能使 Wwtr1/TAZ 成为研究机械转导、上皮–间质可塑性以及情境特异性转录网络的常见靶点。
TAZ CRISPR激活质粒（m）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Wwtr1的表达。
TAZ CRISPR激活质粒（m）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的Wwtr1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于Wwtr1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性TAZ表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的Wwtr1位点，并能够研究内源性位点上依赖于TAZ的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Wwtr1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟TAZ通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。