TAP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423266

概要

Tap2 は、抗原プロセシング関連トランスポーター2（TAP2）をコードする。TAP2 は ATP 結合カセット（ABC）トランスポーターであり、TAP1 とヘテロ二量体を形成して、プロテアソーム由来ペプチドを細胞質から小胞体へ移送し、MHC クラス I 分子へのロードを可能にする。この活性は抗原プロセシングと提示の中核をなし、ユビキチン–プロテアソーム系による分解回転、小胞体でのペプチドロード、そして CD8+ T 細胞による免疫監視を結び付ける。TAP2 の機能はペプチドローディング複合体と連携し、MHC I 免疫ペプチドームの質と多様性に影響を与えることで、感染や免疫介在性ストレスに対する応答を形作る。TAP2 活性の変化は、MHC I の細胞表面発現低下や免疫回避表現型と関連づけられており、炎症生物学やがん免疫学研究の観点から重要である。

TAP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTap2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tap2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tap2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TAP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TAP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tap2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TAP2の機能に不可欠なTap2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tap2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TAP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTAP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tap2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TAP2 HDRプラスミド（m）および TAP2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTap2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTap2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。