T2R38 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402279
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- T2R38 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico T2R38, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
T2R38 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402279 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O TAS2R38 codifica o recetor de sabor amargo T2R38, um GPCR de classe A que deteta compostos contendo tioureia, como PTC/PROP, e se acopla à sinalização associada à gustducina para modular segundos mensageiros intracelulares, incluindo o fluxo de Ca²⁺, em células quimiossensoriais. Para além da perceção do sabor na cavidade oral, o T2R38 é expresso em epitélios extraorais, onde a sinalização dos recetores amargos contribui para a vigilância quimiossensorial e para a regulação de respostas epiteliais. Haplótipos comuns de TAS2R38 alteram a sensibilidade do recetor e têm sido estudados como determinantes genéticos da perceção do amargo e da variabilidade em comportamentos guiados por quimiossensação. Como recetor sensorial acoplado a GPCR, o T2R38 fornece um modelo acessível para dissecar a sinalização do recetor, o controlo da expressão e as relações genótipo–fenótipo em sistemas celulares humanos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO T2R38 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TAS2R38 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TAS2R38, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TAS2R38 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína T2R38.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TAS2R38 para a investigação da sinalização de T2R38, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TAS2R38 críticos para a função T2R38
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TAS2R38 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo T2R38 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo T2R38 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TAS2R38. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo T2R38 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR T2R38 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TAS2R38 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TAS2R38 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.