T2R14 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410582-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- T2R14O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase T2R14 (h) e o Plasmídeo Double Nickase T2R14 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TAS2R14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
T2R14 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410582-NIC | 20 µg | $410.00 |
TAS2R14 codifica o receptor humano de gosto amargo T2R14, um GPCR de classe A que detecta diversos compostos amargos e se acopla a proteínas G heterotriméricas para regular a sinalização por segundos mensageiros. A ativação do receptor geralmente envolve vias dependentes de PLCβ, que elevam o cálcio intracelular e modulam a MAPK e outras redes de sinalização a jusante, influenciando secreção, motilidade e programas de defesa inata em tecidos extraorais. A expressão de TAS2R14 foi relatada para além do sistema gustativo, incluindo epitélios das vias aéreas e do trato gastrointestinal, onde a sinalização quimiossensorial pode moldar respostas de barreira e inflamatórias. Alterações na sinalização de receptores de amargo têm sido investigadas no contexto de hiper-reatividade das vias aéreas, condições inflamatórias crônicas e mudanças de sinalização associadas a tumores, apoiando sua relevância em estudos de mecanismos de doença.
T2R14 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TAS2R14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TAS2R14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TAS2R14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TAS2R14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.