T-type Ca++ CP α1GCRISPR激活质粒(h): sc-418331-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- T-type Ca++ CP α1G CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- T-type Ca++ CP α1G CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 T-type Ca++ CP α1G CRISPR 激活质粒 (h) 和 T-type Ca++ CP α1G CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 CACNA1G 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
T-type Ca++ CP α1GCRISPR激活质粒(h) | sc-418331-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
T-type Ca++ CP α1GCRISPR激活质粒(h2) | sc-418331-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
CACNA1G 编码 Cav3.1 T 型 Ca++ 通道的 α1G 成孔亚基。Cav3.1 属于低电压激活型通道电导，可支持“窗口电流”并促进膜电位的节律性去极化。通过在接近静息电位时塑造细胞内钙瞬变，Cav3.1 影响神经元兴奋性、起搏活动，以及将膜活动耦联至基因调控与突触功能的钙依赖性信号级联反应。CACNA1G 的活性与更广泛的 Ca2+ 稳态网络和兴奋性通路相整合，其中包括钙依赖性激酶以及对膜电位变化作出反应的转录程序。文献报道，T 型钙通道功能失调与丘脑-皮层振荡及兴奋性表型的改变有关，这些改变与神经系统疾病和神经精神疾病的机制相关。
T-type Ca++ CP α1G CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CACNA1G的表达。
T-type Ca++ CP α1G CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的CACNA1G基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于CACNA1G转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性T-type Ca++ CP α1G表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的CACNA1G位点，并能够研究内源性位点上依赖于T-type Ca++ CP α1G的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CACNA1G表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟T-type Ca++ CP α1G通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。