Synip Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-408351

Visão geral

O STXBP4 humano codifica a Synip (proteína 4 ligante de sintaxina), um regulador citosólico da fusão de membranas mediada por SNARE que modula o tráfego vesicular e a exocitose dependente de estímulo. A Synip interage com membros da família das sintaxinas para influenciar a dinâmica de ancoragem (docking) e fusão na membrana plasmática, impactando assim a entrega e a renovação (turnover) de proteínas de membrana. Por meio do seu papel em programas de tráfego ligados ao transporte responsivo à insulina e a processos secretórios mais amplos, o STXBP4 pode afetar o metabolismo celular, a amplitude da sinalização e a organização dos compartimentos de membrana. Alterações no tráfego dependente de Synip têm sido investigadas em contextos que incluem desregulação metabólica e redes de sinalização relacionadas ao câncer, nas quais o transporte vesicular contribui para a disponibilidade de receptores e para a comunicação cruzada (crosstalk) entre vias.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Synip (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene STXBP4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do STXBP4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do STXBP4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Synip.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de STXBP4 para a investigação da sinalização de Synip, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) STXBP4 críticos para a função Synip
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos STXBP4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Synip Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Synip Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus STXBP4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Synip Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Synip (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia STXBP4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo STXBP4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.