SWAP-70 Plasmídeo duplo de Nickase (h2): sc-403465-NIC-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SWAP-70O plasmídeo de dupla Nickase (h2) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SWAP-70 (h2) e o Plasmídeo Double Nickase SWAP-70 (h22) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SWAP70. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SWAP-70 Anticorpo (F-3): sc-390431
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SWAP-70 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403465-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O SWAP70 humano codifica a SWAP-70, um adaptador de sinalização que se liga a fosfatidilinositol, é recrutado para membranas ativadas a jusante da PI3K e sustenta a remodelação do citoesqueleto de actina dependente de GTPases da família Rho. A SWAP-70 contribui para a ativação, adesão e migração de células imunes ao coordenar a dinâmica do citoesqueleto e a sinalização desencadeada por receptores em processos como respostas de células B, tráfego dependente de antígeno e funções fagocíticas. A desregulação de vias associadas à SWAP70 tem sido investigada no contexto de disfunção imune e da motilidade/invasão de células tumorais, em que alterações na remodelação de actina podem influenciar o comportamento celular. Modelos de perturbação de SWAP70 permitem estudos mecanísticos da sinalização PI3K–Rac/Rho, do tráfego de membranas e de fenótipos controlados pelo citoesqueleto, usando edição gênica para investigar efeitos sobre migração, morfologia e saídas de sinalização dependentes de estímulo.
SWAP-70 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h2) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SWAP70 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SWAP70. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SWAP70. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SWAP70 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.