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SUV39H1CRISPR激活质粒(m) | sc-423224-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
SUV39H1CRISPR激活质粒(m2) | sc-423224-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
小鼠 Suv39h1 编码 SUV39H1,这是一种含 SET 结构域的组蛋白甲基转移酶,可催化 H3K9 三甲基化,从而促进异染色质形成并抑制转录。SUV39H1 与 HP1 蛋白及 DNA 甲基化相关机制协同作用,在着丝粒周围重复序列处稳定表观遗传沉默、维持基因组完整性,并确保染色体正确分离。通过调控染色质压缩状态,SUV39H1 影响细胞周期进程、DNA 损伤应答以及谱系特异性的基因程序。SUV39H1 活性失调及 H3K9me3 图谱改变与癌症生物学、细胞衰老及神经系统疾病模型中观察到的异常转录状态相关,因此 Suv39h1 是表观遗传与染色质研究中的常见靶点。
SUV39H1 CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Suv39h1的表达。
SUV39H1 CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的Suv39h1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于Suv39h1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SUV39H1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的Suv39h1位点,并能够研究内源性位点上依赖于SUV39H1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Suv39h1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SUV39H1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。