Superoxide Dismutase 1/SOD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423069

概要

Sod1 は細胞質に存在する Cu/Zn スーパーオキシドジスムターゼである SOD1 をコードしており、主要な抗酸化酵素としてスーパーオキシドアニオンを過酸化水素と酸素に変換し、酸化損傷を抑制します。SOD1 は細胞内のレドックス恒常性を形成することで、ミトコンドリア機能、タンパク質品質管理、ならびに NRF2 を介した抗酸化プログラムを含むストレス応答性シグナル伝達経路に影響を及ぼします。SOD1 活性の撹乱は、酸化ストレス、神経炎症、プロテオトキシシティに対する感受性を変化させ、SOD1 機能不全は神経変性や関連する運動ニューロン表現型を研究するための機序解明の入り口として広く用いられています。マウス系では、Sod1 は活性酸素種（ROS）の処理と代謝、加齢に伴う組織障害、レドックス感受性の転写制御とを結び付けて解析するための扱いやすいモデルとして機能します。

Superoxide Dismutase 1/SOD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSod1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sod1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sod1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Superoxide Dismutase 1/SOD1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Superoxide Dismutase 1/SOD1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sod1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Superoxide Dismutase 1/SOD1の機能に不可欠なSod1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sod1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Superoxide Dismutase 1/SOD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSuperoxide Dismutase 1/SOD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sod1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Superoxide Dismutase 1/SOD1 HDRプラスミド（m）および Superoxide Dismutase 1/SOD1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSod1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSod1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。