SULT1A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423199
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SULT1A1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SULT1A1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SULT1A1 Anticorpo (214E2Z): sc-517645
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SULT1A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423199 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Sult1a1 do camundongo codifica a sulfotransferase citosólica SULT1A1, uma enzima de fase II do metabolismo de xenobióticos que catalisa a sulfonação de compostos fenólicos usando 3′-fosfoadenosina-5′-fosfossulfato (PAPS) como doador de sulfato. Essa reação aumenta a polaridade do substrato, influenciando a depuração celular, a biodisponibilidade e a reatividade química, integrando-se a redes mais amplas de desintoxicação que incluem a oxidação por citocromo P450 e vias de conjugação. A atividade da SULT1A1 modula o processamento hepático e extra-hepático de constituintes da dieta, substâncias químicas ambientais e algumas moléculas sinalizadoras selecionadas, afetando assim as respostas ao estresse oxidativo e a sinalização mediada por metabólitos. Alterações na capacidade de sulfatação têm sido associadas à variabilidade na sensibilidade a tóxicos e a lesão tecidual associada à inflamação em modelos relevantes para doenças da fisiologia hepática e gastrointestinal.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SULT1A1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sult1a1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sult1a1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sult1a1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SULT1A1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sult1a1 para a investigação da sinalização de SULT1A1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sult1a1 críticos para a função SULT1A1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sult1a1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SULT1A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SULT1A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sult1a1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SULT1A1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SULT1A1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sult1a1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sult1a1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.