STAU1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423181

概要

マウスStau1は、二本鎖RNA結合タンパク質であるSTAU1をコードしており、Staufen依存的mRNA分解を介するとともに、mRNAの局在、安定性、翻訳を制御する。STAU1はリボ核タンパク質複合体の組み立てを通じて転写後の遺伝子制御に関与し、RNA監視機構をストレス顆粒の動態や細胞骨格輸送などの過程と結び付ける。哺乳類細胞では、STAU1活性の変化が神経機能や筋恒常性に影響するRNA代謝の破綻と関連付けられており、神経変性および神経筋表現型の研究において重要である。RNA制御ネットワークの一結節点として、STAU1は、mRNAの運命決定が細胞状態やプロテオーム出力をどのように形作るかを解明するための、取り組みやすい入口となる。

STAU1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるStau1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Stau1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Stau1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、STAU1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、STAU1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Stau1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• STAU1の機能に不可欠なStau1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Stau1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• STAU1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSTAU1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Stau1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  STAU1 HDRプラスミド（m）および STAU1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはStau1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のStau1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。