SSTR5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404199

Descripción general

El receptor de somatostatina 5 (SSTR5) es un receptor acoplado a proteínas G para la somatostatina que se acopla predominantemente a proteínas Gi/o para suprimir la actividad de la adenilil ciclasa, reducir el AMPc intracelular y modular la señalización de los canales iónicos. A través de efectos posteriores sobre MAPK/ERK y otras vías reguladas por GPCR, SSTR5 influye en la secreción hormonal, la neurotransmisión y los programas de proliferación de manera dependiente del tipo celular. En tejidos humanos, SSTR5 contribuye a la regulación endocrina y metabólica, incluida la modulación de la señalización del eje de la insulina y de la hormona del crecimiento. La señalización desregulada de los receptores de somatostatina se ha asociado con fenotipos secretorios alterados y comportamientos proliferativos en múltiples contextos relevantes para la enfermedad, lo que convierte a SSTR5 en un nodo útil para el análisis de vías de señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SSTR5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SSTR5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SSTR5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SSTR5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SSTR5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SSTR5 para la investigación de la señalización de SSTR5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SSTR5 críticos para la función de SSTR5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SSTR5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SSTR5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SSTR5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SSTR5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SSTR5 (h) y el plásmido HDR SSTR5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SSTR5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SSTR5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.