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SSB-2双切口酶质粒(h) | sc-408079-NIC | 20 µg | $410.00 |
人类基因 SPSB2 编码 SSB-2,这是一种含有 SOCS box 的适配蛋白,作为 Cullin-RING 型 E3 泛素连接酶复合物中的底物识别组分发挥作用。SSB-2 通过其 SPRY 结构域与特定客户蛋白结合,促进这些蛋白的泛素化并经蛋白酶体降解,从而塑造细胞因子和生长因子信号输入下游的信号转导网络。SPSB2 的活性与炎症信号和先天免疫反应的调控有关,包括对与 JAK/STAT 及 NF-κB 相关过程相交叉的通路进行调节。在细胞因子信号与蛋白稳定性受扰的情境中,涉及 SPSB2 的泛素介导蛋白稳态失衡可能导致免疫稳态改变,并产生与疾病相关的表型。
SSB-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SPSB2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SPSB2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SPSB2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SPSB2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。