SP140 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436685
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SP140 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SP140, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SP140 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-436685 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SP140 codifica uma proteína nuclear com padrão pontilhado (“speckled”) que atua como leitora epigenética e reguladora da transcrição em células imunes, com funções ligadas à organização da cromatina e ao controle de programas gênicos inflamatórios. Em camundongos, a SP140 é enriquecida em linhagens hematopoéticas e tem sido associada à modulação da sinalização imune inata e adaptativa, incluindo vias que influenciam respostas de citocinas e redes transcricionais dirigidas por antígenos. Por meio de seus domínios de ligação à cromatina, a SP140 pode moldar estados de expressão gênica relevantes para a diferenciação e a ativação de macrófagos e linfócitos. A atividade desregulada de SP140 tem sido relacionada a patologias mediadas pelo sistema imune e a fenótipos de resposta do hospedeiro, tornando-a um alvo útil para estudar mecanismos inflamatórios e o controle transcricional.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SP140 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sp140 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sp140, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sp140 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SP140.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sp140 para a investigação da sinalização de SP140, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sp140 críticos para a função SP140
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sp140 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SP140 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SP140 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sp140. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SP140 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SP140 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sp140 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sp140 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.