SNX9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426112

概要

Snx9はソーティングネキシン9（SNX9）をコードしており、SNX9はSH3ドメインおよびPXドメインをもつアダプタータンパク質として、ホスホイノシチド結合を膜リモデリングやクラスリン介在性エンドサイトーシスと結び付けます。SNX9はダイナミンやN-WASPと相互作用することで、エンドサイトーシスおよびアクチン制御に関わる分子機構の集合を調整し、ベシクルの切断、受容体の取り込み、ならびに細胞膜での膜輸送を支えます。これらの役割を通じて、SNX9は取り込まれた受容体下流のシグナル伝達ダイナミクスに影響し、細胞移動や膜のターンオーバーなどの過程における細胞骨格再編成にも寄与します。エンドサイトーシス輸送とアクチン制御の異常は、がん関連シグナルや神経生物学的表現型に関与するとされており、Snx9は疾患関連の文脈における経路の再配線（rewiring）の機構解明研究に有用なノードとなります。

SNX9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSnx9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Snx9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Snx9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SNX9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SNX9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Snx9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SNX9の機能に不可欠なSnx9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Snx9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SNX9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSNX9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Snx9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SNX9 HDRプラスミド（m）および SNX9 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSnx9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSnx9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。