SMG5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406989-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SMG5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SMG5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SMG5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SMG5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SMG5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406989-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SMG5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406989-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMG5 codifica um fator central conservado da via de degradação de mRNA mediada por nonsense (NMD), que ajuda a eliminar transcritos contendo códons de terminação prematuros e modula a estabilidade de mRNAs fisiológicos selecionados. SMG5 associa-se à UPF1 fosforilada e coopera com complexos contendo PP2A para promover a desfosforilação de UPF1, coordenando a transição da vigilância para a degradação do mRNA. Por meio dessas atividades, SMG5 contribui para o controle de qualidade de RNA dependente da tradução, para a proteostase e para a regulação de programas de expressão gênica durante respostas celulares ao estresse. A desregulação de componentes da NMD, incluindo SMG5, tem sido associada a alterações na homeostase do transcriptoma e a fenótipos relevantes para a neurobiologia do desenvolvimento e para a biologia do câncer, tornando SMG5 um ponto útil para estudos mecanísticos de vigilância de RNA.
SMG5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SMG5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SMG5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SMG5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SMG5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.