Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SMARCA4/Brg1双切口酶质粒(m): sc-423026-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SMARCA4/Brg1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SMARCA4/Brg1双切酶质粒（m）和SMARCA4/Brg1双切酶质粒（m2）编码针对Smarca4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SMARCA4/Brg1: sc-17796，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SMARCA4/Brg1双切口酶质粒(m) | sc-423026-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SMARCA4/Brg1双切口酶质粒(m2) | sc-423026-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Smarca4 基因编码 SMARCA4/Brg1，它是 SWI/SNF（BAF）染色质重塑复合体的 ATP 酶催化亚基。该复合体通过重新定位核小体来调控启动子与增强子的可及性。借助 ATP 依赖的染色质重塑作用，SMARCA4 融入并协调控制细胞周期进程、谱系决定、DNA 复制以及 DNA 损伤应答等转录程序。SMARCA4/Brg1 的功能与 Polycomb 介导的抑制通路、p53 信号以及发育相关转录因子所调控的通路相互交织，从而在不同组织中塑造表观遗传状态。包括 SMARCA4 在内的 SWI/SNF 组分失调与肿瘤发生转化及发育表型有关，因此 Smarca4 是开展基于染色质的基因调控机制研究的关键靶点。
SMARCA4/Brg1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Smarca4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Smarca4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Smarca4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Smarca4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。