SLAIN2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429242

Visão geral

Slain2 codifica a SLAIN2, um regulador de rastreamento da extremidade positiva dos microtúbulos (+TIP) que coopera com proteínas EB e outros complexos +TIP para promover o crescimento persistente dos microtúbulos, a captura cortical e a dinâmica adequada do fuso mitótico. Por meio do seu papel na organização do tráfego dependente de microtúbulos e da polaridade celular, a SLAIN2 sustenta processos como a progressão mitótica, o transporte intracelular e o crescimento de neuritos. A perturbação das redes de +TIP e da estabilidade dos microtúbulos é amplamente relevante para fenótipos do neurodesenvolvimento e de doenças neurodegenerativas, bem como para a instabilidade cromossômica em estados celulares proliferativos. Assim, o Slain2 de camundongo serve como um modelo manejável para investigar o controle citoesquelético da divisão e da diferenciação celular em sistemas mamíferos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SLAIN2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Slain2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Slain2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Slain2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SLAIN2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Slain2 para a investigação da sinalização de SLAIN2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Slain2 críticos para a função SLAIN2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Slain2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SLAIN2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SLAIN2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Slain2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SLAIN2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SLAIN2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Slain2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Slain2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.