SIRT4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401187-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SIRT4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SIRT4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SIRT4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SIRT4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SIRT4 Anticorpo (95.1): sc-135797
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SIRT4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SIRT4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SIRT4 codifica uma sirtuína mitocondrial que utiliza NAD+ para regular modificações pós-traducionais, ligando o estado redox celular ao controlo metabólico. A SIRT4 modula a seleção de combustíveis mitocondriais através da inibição da glutamato desidrogenase e da regulação da anaplerose de aminoácidos, com efeitos a jusante sobre o ciclo do TCA, a fosforilação oxidativa e a homeostase das espécies reativas de oxigénio. Também influencia o metabolismo lipídico, vias de secreção de insulina e respostas celulares ao stress através de sinalização mitocondrial coordenada. A atividade desregulada de SIRT4 tem sido associada a fenótipos metabólicos alterados e tem sido investigada em contextos que incluem o metabolismo do cancro, a neurodegeneração e modelos de doença cardiometabólica.
SIRT4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SIRT4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SIRT4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SIRT4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SIRT4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.