Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SIRT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-430046-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SIRT1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SIRT1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase SIRT1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Sirt1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SIRT1 Anticorpo (B-7): sc-74465
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SIRT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-430046-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SIRT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-430046-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Sirt1** em camundongos codifica a **SIRT1**, uma desacetilase dependente de **NAD⁺** que conecta o estado energético celular à remodelação da cromatina e ao controle transcricional. A SIRT1 regula a acetilação de fatores-chave, incluindo **p53**, proteínas **FOXO**, **PGC-1α** e **NF-κB**, influenciando, assim, respostas ao estresse, biogênese mitocondrial, inflamação, autofagia e pontos de checagem do ciclo celular. Por meio de interações com a sinalização **AMPK–mTOR** e vias metabólicas, a SIRT1 contribui para respostas adaptativas à disponibilidade de nutrientes e ao estresse oxidativo. Alterações na atividade da SIRT1 têm sido associadas, em sistemas modelo, a disfunção metabólica, processos relacionados à neurodegeneração e à biologia tumoral, tornando-a um alvo amplamente estudado em redes epigenéticas e de sinalização.
SIRT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sirt1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sirt1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sirt1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sirt1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.