非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SIRT1 抗体 (33. 36): sc-135792. NTERA-2 cl. D1 (A), JM1 (B), ALL-SIL (C) 和 AN3 CA (D) 全细胞裂解液中 SIRT1 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SIRT1双切口酶质粒(h): sc-400085-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SIRT1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SIRT1双切酶质粒（h）和SIRT1双切酶质粒（h2）编码针对SIRT1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SIRT1: sc-74504，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SIRT1双切口酶质粒(h) | sc-400085-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SIRT1双切口酶质粒(h2) | sc-400085-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SIRT1 编码一种 NAD⁺ 依赖性的蛋白去乙酰化酶，负责协调调控代谢、应激适应以及基因组维持的转录程序。通过去乙酰化 p53、FOXO 因子、NF-κB 和 PGC-1α 等底物，SIRT1 调节与 DNA 损伤应答、线粒体生物发生、自噬以及炎症信号传导相关的通路。SIRT1 的活性通过 NAD⁺ 的可用性与细胞能量状态紧密耦联，并与 AMPK–mTOR 以及胰岛素/IGF 信号网络发生交互调控。SIRT1 信号失调与多种衰老相关表型改变有关，并已在代谢性疾病、神经退行性变以及肿瘤生物学等研究背景中得到广泛探讨。
SIRT1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 SIRT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SIRT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏SIRT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了SIRT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。