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SIK2慢病毒激活颗粒(h) | sc-406982-LAC | 200 µl | $455.00 |
SIK2(盐诱导激酶2,salt-inducible kinase 2)是一种属于 AMPK 相关激酶家族的丝氨酸/苏氨酸激酶,能够整合代谢与应激信号,以协调转录与细胞骨架相关的程序。它通过对 CRTC 共激活因子的磷酸化依赖性调控来影响 CREB/CRTC 信号通路,将 cAMP 信号与基因表达连接起来,参与葡萄糖和脂质代谢、脂肪细胞功能以及细胞周期进程等过程。SIK2 也被认为与中心体调控和有丝分裂控制有关,从而将激酶信号与细胞增殖及细胞适应性联系起来。SIK2 活性和表达的失调与代谢稳态改变及肿瘤相关信号状态有关,因此它是在人类细胞模型中研究激酶驱动调控的一个有用节点。
SIK2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 SIK2 表达。
SIK2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在SIK2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性SIK2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 SIK2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。