Sigma Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400615-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sigma ReceptorO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Sigma Receptor (h) e o Plasmídeo Double Nickase Sigma Receptor (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SIGMAR1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sigma Receptor Anticorpo (B-5): sc-137075
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sigma Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400615-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sigma Receptor Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400615-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O SIGMAR1 humano codifica o recetor sigma-1, uma chaperona de membrana do retículo endoplasmático, enriquecida em membranas associadas às mitocôndrias, que regula a troca de cálcio, a homeostase lipídica e a sinalização responsiva ao stress. Ao modular a atividade do recetor de IP3, a ancoragem entre RE e mitocôndria e programas da resposta a proteínas mal dobradas, o SIGMAR1 influencia a proteostase, a bioenergética e a sobrevivência celular sob stress oxidativo e proteotóxico. A sinalização do recetor sigma-1 cruza-se com a neurotransmissão, a função de canais iónicos e vias inflamatórias, ligando o SIGMAR1 a mecanismos implicados na neurodegeneração, na dor neuropática e em fenótipos neuropsiquiátricos. Estas propriedades tornam o SIGMAR1 um alvo útil para dissecar a comunicação entre organelos e redes de adaptação ao stress em modelos de células humanas.
Sigma Receptor O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SIGMAR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SIGMAR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SIGMAR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SIGMAR1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.