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Sigma Receptor双切口酶质粒(h) | sc-400615-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sigma Receptor双切口酶质粒(h2) | sc-400615-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类基因 SIGMAR1 编码 σ-1 受体,它是一种位于内质网膜上的分子伴侣,富集于线粒体相关膜(MAM),负责调控钙离子交换、脂质稳态以及应激反应相关信号传导。SIGMAR1 通过调节 IP3 受体活性、内质网-线粒体的连接(tethering)以及未折叠蛋白反应(UPR)程序,影响蛋白质稳态(proteostasis)、生物能量代谢和细胞在氧化应激与蛋白毒性应激下的存活。σ-1 受体信号还与神经递质传递、离子通道功能及炎症通路发生交叉,从而将 SIGMAR1 与神经退行性变、神经病理性疼痛及神经精神表型等相关机制联系起来。这些特性使 SIGMAR1 成为在人类细胞模型中解析细胞器间通讯与应激适应网络的一个有用靶点。
Sigma Receptor 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SIGMAR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SIGMAR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SIGMAR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SIGMAR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。