Siglec-9CRISPR激活质粒(h): sc-406675-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Siglec-9 CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- Siglec-9 CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 Siglec-9 CRISPR 激活质粒 (h) 和 Siglec-9 CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 SIGLEC9 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Siglec-9CRISPR激活质粒(h) | sc-406675-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Siglec-9CRISPR激活质粒(h2) | sc-406675-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
SIGLEC9 编码 Siglec-9，这是一种能结合唾液酸的免疫球蛋白样凝集素，主要表达于中性粒细胞、单核细胞以及部分 NK 细胞亚群。在这些细胞中，Siglec-9 作为抑制性受体发挥作用，可减弱细胞活化。Siglec-9 通过其胞质端的 ITIM 基序招募 SHP-1/SHP-2 等磷酸酶，从而调控免疫受体下游信号传导，进而影响细胞因子产生、脱颗粒、吞噬作用以及氧化爆发等过程。通过识别宿主细胞或发生改变的细胞表面的唾液酸化配体，Siglec-9 有助于维持免疫稳态并调节炎症反应。Siglec-9 信号的失调与病理性免疫抑制及慢性炎症环境有关，因此其常被用作免疫学研究以及肿瘤—免疫相互作用研究中的标志物与关键机制节点。
Siglec-9 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SIGLEC9的表达。
Siglec-9 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的SIGLEC9基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于SIGLEC9转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Siglec-9表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的SIGLEC9位点，并能够研究内源性位点上依赖于Siglec-9的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SIGLEC9表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Siglec-9通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。