Siglec-12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413805

Visão geral

SIGLEC12 codifica a Siglec-12, uma lectina atípica do tipo imunoglobulina ligante de ácido siálico, expressa em contextos epiteliais e imunológicos específicos e localizada na superfície celular. Como membro da família Siglec, a Siglec-12 participa de eventos de reconhecimento dependentes de glicanos que podem influenciar interações célula–célula, endocitose e a modulação de saídas de sinalização a jusante de vias associadas a imunorreceptores. A proteína humana é considerada funcionalmente distinta das Siglecs inibitórias canônicas devido a alterações em motivos conservados, tornando-se um modelo útil para estudar a divergência na sinalização de receptores glicoinmunes. A expressão desregulada de Siglec-12 tem sido investigada no contexto da biologia tumoral e de microambientes inflamatórios, apoiando pesquisas sobre fenótipos dependentes de glicosilação e a comunicação cruzada entre sistema imune e epitélio.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Siglec-12 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SIGLEC12 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SIGLEC12, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SIGLEC12 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Siglec-12.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SIGLEC12 para a investigação da sinalização de Siglec-12, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SIGLEC12 críticos para a função Siglec-12
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SIGLEC12 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Siglec-12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Siglec-12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SIGLEC12. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Siglec-12 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Siglec-12 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SIGLEC12 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SIGLEC12 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.