Shh慢病毒激活颗粒(m): sc-422926-LAC

刺猬因子 Sonic hedgehog（Shh）编码一种可分泌的形态发生素，通过建立浓度依赖的信号提示来统筹胚胎模式形成与组织形态发生。配体经加工并分泌后，SHH 与 PTCH1 结合以解除其对 SMO 的抑制，从而激活 GLI 转录因子；GLI 进一步调控控制细胞增殖、分化以及干/祖细胞命运的基因程序。在小鼠生物学中，Shh 信号对神经管腹侧化、肢芽发育和器官发生至关重要，其失调会扰乱发育相关的基因网络。异常的 SHH–PTCH–SMO–GLI 通路活性也与致癌信号背景及肿瘤相关微环境重塑有关，因此 Shh 是进行通路解析的关键节点。

Shh 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Shh 表达。

Shh 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Shh转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性Shh表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Shh 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。