SHBG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402099
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SHBG O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SHBG, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SHBG Anticorpo (C-2): sc-377032
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SHBG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402099 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A globulina ligadora de hormonas sexuais (SHBG) é uma glicoproteína plasmática secretada que se liga a androgénios e estrogénios e os transporta, regulando assim a fração livre de esteroides circulantes e modulando a disponibilidade hormonal para os tecidos-alvo. Ao amortecer a distribuição dos esteroides e influenciar a entrega de hormonas às células, a SHBG contribui para a homeostase endócrina e para programas de transcrição responsivos a esteroides que moldam a fisiologia metabólica e reprodutiva. Variações na expressão ou na função da SHBG têm sido associadas a alterações na biodisponibilidade de esteroides sexuais e são frequentemente estudadas em relação a características metabólicas e à biologia de doenças dependentes de hormonas, incluindo desregulação do metabolismo da glicose e dos lípidos e fenótipos endócrinos reprodutivos. Modelos in vitro e in vivo de perturbação da SHBG são usados para dissecar mecanismos que ligam o transporte de esteroides a redes de sinalização a jusante e a alterações na expressão génica no fígado e em tecidos periféricos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SHBG (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SHBG em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SHBG, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SHBG na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SHBG.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SHBG para a investigação da sinalização de SHBG, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SHBG críticos para a função SHBG
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SHBG para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SHBG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SHBG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SHBG. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SHBG Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SHBG (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SHBG para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SHBG definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.