SH-PTP2 Plasmide Double Nickase (m): sc-422503-NIC

Il gene murino **Ptpn11** codifica **SH-PTP2 (SHP2)**, una fosfatasi tirosinica proteica citoplasmatica con domini SH2 in tandem, che trasduce segnali provenienti da recettori tirosin-chinasici, recettori per citochine e recettori immunitari inibitori. De-fosforilando proteine di docking chiave e modulando complessi di adattatori, SH-PTP2 promuove la segnalazione **RAS–MAPK/ERK** e può influenzare la dinamica delle vie **PI3K–AKT** e **JAK–STAT**, contribuendo a determinare risposte di proliferazione, differenziamento e migrazione. L’attività di **Ptpn11** partecipa a programmi di segnalazione dello sviluppo e dell’ematopoiesi, e la deregolazione di reti dipendenti da SH-PTP2 è ampiamente studiata in modelli di segnalazione aberrante dei fattori di crescita e di funzione delle cellule immunitarie. In quanto regolatore nodale della segnalazione su fosfotirosina, **Ptpn11** è frequentemente utilizzato per indagare il crosstalk tra vie, il controllo a feedback e la trasduzione del segnale specifica del contesto in cellule e tessuti di topo.

SH-PTP2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Ptpn11 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Ptpn11. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Ptpn11. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Ptpn11 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.