SEZ6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422895

概要

Sez6は、けいれん関連6ホモログ（SEZ6）をコードする遺伝子であり、神経系に高発現するI型膜貫通タンパク質です。SEZ6は、ニューロンの分化、樹状突起の分岐形成（樹状突起アーバリゼーション）、およびシナプス形成に寄与します。SEZ6は膜輸送やプロテオリティック・プロセシング（タンパク質の切断処理）経路にも関与しており、細胞外ドメインのシェディング（ectodomain shedding）などを介して、細胞間シグナル伝達や神経突起伸長プログラムに影響を与えることがあります。マウスモデルでは、Sez6の発現や機能の変化がシナプス結合性や興奮性／抑制性バランスの変動と関連することが示されており、神経発達および発作関連表現型との関わりが支持されています。神経細胞表面に関連する調節因子として、SEZ6は回路成熟や活動依存的可塑性の文脈でしばしば研究されています。

SEZ6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSez6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sez6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sez6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SEZ6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SEZ6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sez6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SEZ6の機能に不可欠なSez6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sez6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SEZ6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSEZ6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sez6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SEZ6 HDRプラスミド（m）および SEZ6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSez6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSez6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。