SerpinA6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407031

Visão geral

SERPINA6 codifica a SerpinA6, também conhecida como globulina ligadora de corticosteroides, um membro secretado da família de inibidores de serinoproteases que regula principalmente a biodisponibilidade sistêmica de glicocorticoides ao se ligar ao cortisol e transportá-lo no plasma. Ao amortecer os níveis de cortisol livre, a SerpinA6 influencia a sinalização do receptor de glicocorticoides e programas transcricionais a jusante que moldam o metabolismo, as respostas imunes e a fisiologia do estresse. A expressão alterada de SERPINA6 ou variações genéticas têm sido associadas à desregulação da atividade do eixo hipotálamo–hipófise–adrenal e a fenótipos relacionados ao cortisol, incluindo suscetibilidade a características metabólicas e inflamatórias. Em sistemas experimentais, SERPINA6 oferece um meio de dissecar a comunicação cruzada da sinalização endócrina com vias secretórias hepáticas e a homeostase de proteínas extracelulares.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SerpinA6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SERPINA6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SERPINA6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SERPINA6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SerpinA6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SERPINA6 para a investigação da sinalização de SerpinA6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SERPINA6 críticos para a função SerpinA6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SERPINA6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SerpinA6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SerpinA6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SERPINA6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SerpinA6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SerpinA6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SERPINA6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SERPINA6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.