Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO SENP8 (h): sc-405158
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- SENP8 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique SENP8, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SENP8 Antibody (E-11): sc-271498
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO SENP8 (h) | sc-405158 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
SENP8 code une protéase à cystéine qui agit comme déneddylase, avec une spécificité pour les substrats conjugués à NEDD8, et contribue au maintien de l’homéostasie de la voie NEDD8. En modulant l’état de neddylation des ligases culline-RING, SENP8 influence le renouvellement des protéines dépendant de l’ubiquitine, la progression du cycle cellulaire et la signalisation en réponse au stress. L’activité de SENP8 est également liée à la régulation des dynamiques de neddylation des cullines dépendantes de DCN1 et, plus globalement, au contrôle de la protéostasie. La dérégulation du cycle NEDD8 et de l’activité des ligases à culline a été associée à des phénotypes oncogéniques ainsi qu’à des processus neurodéveloppementaux ou neurodégénératifs, faisant de SENP8 un nœud pertinent pour les études mécanistiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SENP8 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SENP8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SENP8, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SENP8 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SENP8.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SENP8 pour l'étude de la signalisation de SENP8, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de SENP8 essentiels à la fonction de SENP8
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SENP8 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le SENP8 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SENP8 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SENP8. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le SENP8 plasmide HDR (h) et le SENP8 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SENP8 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SENP8 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.