Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
SENP3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403747
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SENP3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SENP3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SENP3 Anticuerpo (E-7): sc-137219
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SENP3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403747 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SENP3 codifica una proteasa específica de SUMO que desconiuga preferentemente SUMO2/3 de proteínas diana, modulando la dinámica de la SUMOilación reversible. SENP3 se localiza predominantemente en el nucléolo y participa en la biogénesis de ribosomas, la homeostasis nucleolar y la regulación de programas transcripcionales vinculados a las respuestas celulares al estrés. Mediante la modulación de interacciones proteicas dependientes de SUMO, SENP3 influye en procesos como la señalización del daño en el ADN, el control del ciclo celular y la regulación asociada a la cromatina. La actividad desregulada de SENP3 y el desequilibrio de la vía de SUMO se han asociado con una señalización proliferativa alterada y defectos en el mantenimiento del genoma relevantes para la biología del cáncer y otras patologías relacionadas con el estrés.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SENP3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SENP3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SENP3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SENP3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SENP3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SENP3 para la investigación de la señalización de SENP3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SENP3 críticos para la función de SENP3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SENP3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SENP3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SENP3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SENP3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SENP3 (h) y el plásmido HDR SENP3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SENP3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SENP3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.