SEMA5B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422886

개요

Sema5b는 신경 발달과 시냅스 회로 조립 과정에서 접촉 의존적 신호전달을 조절하는 세마포린(semaphorin) 계열의 구성원인 막횡단 유도 신호 단백질 SEMA5B를 암호화한다. SEMA5B는 플렉신(plexin) 수용체와 그 하위의 세포골격 재구성 경로를 통해 축삭 유도, 수상돌기 패턴 형성, 뉴라이트(neurite) 성장에 영향을 미친다. 마우스 모델에서 Sema5b 활성의 변화는 신경 연결성과 가소성의 변화와 연관된 것으로 보고되어, 신경발달 및 신경정신질환의 기전을 연구하는 데 있어 그 중요성을 뒷받침한다. 또한 신경계에서의 발현은 조직 패턴 형성을 좌우하는 세포–세포 간 커뮤니케이션 프로그램을 규명하는 데 유용한 표적으로서의 가치를 제공한다.

SEMA5B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sema5b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sema5b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sema5b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SEMA5B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SEMA5B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sema5b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SEMA5B 기능에 중요한 Sema5b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sema5b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SEMA5B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 SEMA5B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sema5b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SEMA5B HDR 플라스미드 (m) 및 SEMA5B HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sema5b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sema5b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.