SEMA4C CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422882

概要

Sema4c は、膜貫通型のガイダンス分子であるセマフォリン-4C（SEMA4C）をコードしており、プレキシン受容体を介してシグナルを伝達し、細胞間コミュニケーション、方向性のある遊走、ならびに細胞骨格の再編成を制御します。マウス組織では、SEMA4C は神経パターニングを形作り、免疫細胞間相互作用に影響する接触依存的なシグナル伝達事象に寄与し、セマフォリン経路を発生過程および炎症過程と結び付けています。下流の作用はしばしば Rho ファミリー GTPase の制御や MAPK 関連プログラムに収束し、接着ダイナミクスと運動性を協調的に調整します。セマフォリン–プレキシンシグナルの変調は、組織リモデリングの破綻や免疫微小環境の変化と関連付けられており、治療効果を示唆することなく、疾患関連モデルでの研究対象としての意義を支持します。

SEMA4C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSema4c遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sema4c内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sema4cのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SEMA4Cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SEMA4Cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sema4c欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SEMA4Cの機能に不可欠なSema4cエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sema4cゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SEMA4C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSEMA4C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sema4c遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SEMA4C HDRプラスミド（m）および SEMA4C HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSema4cホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSema4c標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。