Selenoprotein V Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407114

Panoramica

SELENOV codifica la selenoproteina V, una proteina contenente selenio che incorpora selenocisteina ed è associata all’omeostasi redox cellulare. Come altre selenoproteine, è coinvolta nel controllo dello stress ossidativo e in processi redox basati sui tioli che influenzano il ripiegamento proteico, la fedeltà della segnalazione e la protezione dalle specie reattive dell’ossigeno. Alterazioni nella biologia delle selenoproteine e nell’utilizzo del selenio possono influire su vie coinvolte nell’infiammazione e nella regolazione metabolica, rendendo SELENOV rilevante per studi meccanicistici delle risposte adattative allo stress. Il suo profilo di espressione e la prevista attività redox supportano l’indagine in contesti in cui l’equilibrio ossidativo e le reti proteiche dipendenti dal selenio contribuiscono a fenotipi cellulari associati a malattia.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Selenoprotein V (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SELENOV in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SELENOV insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SELENOV a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Selenoprotein V.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SELENOV per lo studio della segnalazione di Selenoprotein V, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SELENOV critici per la funzione di Selenoprotein V
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SELENOV per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Selenoprotein V CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Selenoprotein V CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SELENOV. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Selenoprotein V Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Selenoprotein V (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SELENOV per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SELENOV definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.