Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Sec8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422866
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sec8 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Sec8, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sec8 Anticorpo (B-11): sc-514215
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sec8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422866 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Exoc4 codifica a Sec8, uma subunidade essencial do complexo exocisto octamérico, que medeia a ancoragem de vesículas secretórias a locais definidos da membrana plasmática antes da fusão dependente de SNARE. Em células de camundongo, a Sec8 ajuda a coordenar a exocitose polarizada e o tráfego de membranas que sustentam processos como polaridade epitelial, crescimento de neuritos, citocinese e reciclagem de receptores, integrando sinais de pequenas GTPases, incluindo Ral, Rab e Cdc42. A função do exocisto está intimamente ligada ao remodelamento do citoesqueleto e à migração celular direcionada, tornando a Sec8 um ponto útil para estudar vias que governam a organização tecidual e a fidelidade do transporte intracelular. A desregulação do tráfego dependente do exocisto tem sido associada a alterações na polaridade celular e a dinâmicas de sinalização aberrantes relevantes para pesquisas em desenvolvimento e neurobiologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sec8 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Exoc4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Exoc4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Exoc4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sec8.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Exoc4 para a investigação da sinalização de Sec8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Exoc4 críticos para a função Sec8
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Exoc4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Sec8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Sec8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Exoc4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Sec8 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Sec8 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Exoc4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Exoc4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.