SEC16L Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411387-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SEC16LO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SEC16L (h) e o Plasmídeo Double Nickase SEC16L (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SEC16A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SEC16L Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-411387-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SEC16L Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-411387-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SEC16A codifica a SEC16L, um arcabouço periférico associado à membrana que organiza os sítios de saída do retículo endoplasmático (RE) e coordena a montagem do revestimento COPII durante o transporte do RE para o Golgi. Ao regular o recrutamento e a renovação dos componentes do COPII, a SEC16L ajuda a controlar o fluxo secretório, o tráfego de membranas e a homeostase de organelas, com efeitos a jusante sobre a proteostase e a adaptação celular ao estresse. Alterações na função inicial da via secretória podem influenciar o tráfego de receptores de sinalização e a regulação metabólica, e a desregulação de SEC16A/SEC16L tem sido investigada em contextos nos quais estresse do RE, secreção e dinâmica de membranas contribuem para fenótipos relevantes para doenças. Assim, a SEC16L é um alvo útil para estudar como a exportação do RE se relaciona com a autofagia, a sinalização da resposta a proteínas mal dobradas (UPR) e o controle do estado celular dependente de tráfego.
SEC16L O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SEC16A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SEC16A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SEC16A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SEC16A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.