SDHC Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405559-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SDHCO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SDHC (h) e o Plasmídeo Double Nickase SDHC (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SDHC. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SDHC Anticorpo (C-2): sc-515102
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SDHC Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405559-NIC | 20 µg | $410.00 |
SDHC codifica a subunidade C do complexo succinato desidrogenase ancorada à membrana, um componente essencial do complexo II mitocondrial que conecta o ciclo do ácido tricarboxílico (TCA) à cadeia de transporte de elétrons ao sustentar a oxidação do succinato e a transferência de elétrons para a ubiquinona. Como parte da âncora na membrana interna mitocondrial, a SDHC ajuda a estabilizar a montagem do complexo II e permite uma fosforilação oxidativa eficiente, influenciando o equilíbrio redox celular e o manejo de espécies reativas de oxigênio. A disrupção de SDHC pode prejudicar a respiração mitocondrial e promover o acúmulo de succinato, com efeitos downstream na sinalização metabólica e na regulação epigenética por meio da alteração da atividade de dioxigenases dependentes de α-cetoglutarato. Alterações em SDHC estão associadas à disfunção mitocondrial e têm sido implicadas na biologia do paraganglioma/feocromocitoma hereditários, tornando-o um alvo relevante para o estudo de reprogramação metabólica e vias de resposta ao estresse.
SDHC O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SDHC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SDHC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SDHC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SDHC interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.