Plasmide Double Nickase (h) SCGF: sc-411000-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SCGF correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SCGF Double Nickase (h) et le plasmide SCGF Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CLEC11A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SCGF | sc-411000-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SCGF | sc-411000-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CLEC11A code pour le facteur de croissance des cellules souches (SCGF), une cytokine sécrétée de la famille des lectines de type C, impliquée dans le maintien des cellules souches et progénitrices hématopoïétiques ainsi que dans la signalisation de la niche stromale–hématopoïétique. Le SCGF soutient des programmes de prolifération et de survie des progéniteurs et est couramment étudié dans le contexte de la différenciation régulée par les cytokines, du dialogue avec les voies de signalisation inflammatoires et de la biologie du microenvironnement médullaire. Des altérations de l’expression de CLEC11A/SCGF ont été associées à une hématopoïèse dérégulée et à des interactions tumeur–stroma, ce qui le rend pertinent pour des recherches sur le biais de lignée myéloïde, les phénotypes de défaillance médullaire et le remodelage du microenvironnement associé au cancer. Ces caractéristiques font de CLEC11A une cible utile pour disséquer les signaux extracellulaires qui influencent les décisions de destinée des cellules souches et le développement des cellules immunitaires.
SCGF Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CLEC11A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CLEC11A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CLEC11A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CLEC11A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.