Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
SARM CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-403427
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SARM CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在SARM基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SARM CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-403427 | 20 µg | $397.00 |
概述
无菌α结构域与TIR基序含量蛋白1（SARM1；SARM）是一种轴突富集的先天免疫适配蛋白，同时也是一种NAD酶（NADase），作为程序性轴突变性（programmed axon degeneration）的核心执行者发挥作用。在神经元损伤或代谢应激发生时，SARM1的激活会促使NAD+迅速耗竭、能量失败以及细胞骨架解体，并与调控NMN/NAD稳态、线粒体功能障碍、钙离子内流和MAPK信号传导等通路相整合。SARM1活性失调已被认为与神经退行性及神经炎症相关情境有关，包括外周神经病变和与轴突病变相关的疾病，在这些情况下轴突维持与应激反应受损。作为连接TIR结构域生物学与代谢崩溃的信号枢纽，SARM1因其在轴突完整性、神经元存活以及先天免疫相关信号中的作用而受到广泛研究。
SARM CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中SARM1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对SARM1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏SARM1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使SARM蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建SARM1缺失的细胞模型，用于SARM信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 SARM 功能至关重要的 SARM1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 SARM1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 SARM CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 SARM CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 SARM1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 SARM HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 SARM HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由SARM1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定SARM1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。