SAP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402165-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SAPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SAP (h) e o Plasmídeo Double Nickase SAP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para APCS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SAP Anticorpo (C-11): sc-393948
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SAP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402165-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SAP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402165-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APCS codifica o componente amiloide P sérico (SAP), uma proteína de reconhecimento de padrões da família das pentraxinas que circula no plasma e se liga a ligantes de modo dependente de cálcio, incluindo DNA, cromatina e polissacarídeos microbianos. O SAP contribui para a vigilância imunológica inata e para a opsonização ao acionar processos associados ao complemento e vias de depuração mediadas por receptores Fc, e pode associar-se a componentes da matriz extracelular durante respostas inflamatórias. Devido à sua elevada afinidade por fibrilas amiloides e outros agregados de proteínas mal dobradas, o SAP é amplamente utilizado como ferramenta molecular para estudar a biologia do amiloide, a deposição de proteínas e a persistência de agregados extracelulares nos tecidos. Interações alteradas do SAP e mudanças regulatórias associadas ao APCS têm sido investigadas no contexto de inflamação sistêmica e de patologias relacionadas ao amiloide, apoiando estudos mecanísticos sobre o processamento de complexos imunes e a estabilização de agregados.
SAP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus APCS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de APCS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função APCS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com APCS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.