Plasmide Double Nickase (m) SAMHD1: sc-424985-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) SAMHD1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SAMHD1 Double Nickase (m) et le plasmide SAMHD1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Samhd1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) SAMHD1 | sc-424985-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) SAMHD1 | sc-424985-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La SAMHD1 murine (Samhd1) code une dNTP triphosphohydrolase qui régule les réserves intracellulaires de désoxynucléotides et contribue à la stabilité du génome lors de la réplication et de la réparation de l’ADN. En modulant la disponibilité des nucléotides, SAMHD1 influence la progression du cycle cellulaire, les réponses au stress de réplication et la signalisation des dommages à l’ADN, et peut affecter la permissivité des cellules aux rétroéléments ainsi qu’à la rétrotranscription virale. L’activité de SAMHD1 est liée à l’homéostasie de l’immunité innée via ses effets sur les voies de détection des acides nucléiques cytosoliques et sur les programmes de gènes stimulés par l’interféron. Une dérégulation du métabolisme des nucléotides dépendant de SAMHD1 et de la surveillance des acides nucléiques a été associée à des phénotypes inflammatoires et à la biologie tumorale dans des modèles expérimentaux, faisant de Samhd1 un locus utile pour des études mécanistiques de la maintenance du génome et de la signalisation immunitaire.
SAMHD1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Samhd1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Samhd1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Samhd1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Samhd1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.