非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SAHH 抗体 (F-11): sc-365070. 在 HeLa (A), HL-60 (B), F9 (C) 和 ES-2 (D) 全细胞裂解液以及大鼠结肠 (E) 和大鼠睾丸 (F) 组织提取物中 SAHH 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SAHH CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402617
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SAHH CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在SAHH基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SAHH: sc-271389，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SAHH CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-402617 | 20 µg | $397.00 |
概述
AHCY 编码 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶（SAHH），这是蛋氨酸循环中的关键酶，负责将 S-腺苷同型半胱氨酸水解为腺苷和同型半胱氨酸。该反应通过解除对依赖 S-腺苷甲硫氨酸（SAM）的甲基转移酶的反馈抑制，维持细胞的甲基化能力。借由这一作用，SAHH 影响表观遗传调控、RNA 与蛋白质甲基化以及磷脂生物合成，将一碳代谢与更广泛的基因表达程序调控整合起来。AHCY 活性受到扰动会改变甲基化潜能与代谢稳态，进而影响与增殖、分化和应激反应相关的通路。SAHH 功能异常已在甲基化相关疾病以及与肿瘤生物学、免疫与神经科学研究模型相关的细胞表型背景中得到研究。
SAHH CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中AHCY基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对AHCY基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏AHCY开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使SAHH蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建AHCY缺失的细胞模型，用于SAHH信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 SAHH 功能至关重要的 AHCY 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 AHCY 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 SAHH CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 SAHH CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 AHCY 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 SAHH HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 SAHH HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由AHCY同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定AHCY靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。