RyR-2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402986

概述

RYR2 编码雷诺定受体2（ryanodine receptor 2，RyR-2），这是一种四聚体的细胞内 Ca²⁺ 释放通道，定位于肌浆网/内质网膜上，通过触发“钙诱导的钙释放”（calcium-induced calcium release）来介导兴奋–收缩耦联。RyR-2 的活性协调 Ca²⁺ 瞬变，从而调控心肌细胞收缩、线粒体代谢以及 Ca²⁺ 依赖性的信号通路，其中包括与 CaMKII 和钙调神经磷酸酶/ NFAT 相关的转录反应。该通道的功能受大分子复合体装配、翻译后修饰以及腔内 Ca²⁺ 感知等因素塑造，将肾上腺素能输入与细胞内 Ca²⁺ 稳态整合在一起。RYR2 的遗传与功能性扰动与遗传性心律失常综合征及心肌病相关表型有关，使其成为研究心脏钙处理与应激响应信号的关键节点。

RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中RYR2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对RYR2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏RYR2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建RYR2缺失的细胞模型，用于RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout 功能至关重要的 RYR2 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 RYR2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 RYR2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 RyR-2 CRISPR/Cas9 Knockout HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由RYR2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定RYR2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。