RUNX2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400183-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RUNX2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RUNX2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RUNX2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RUNX2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RUNX2 Anticorpo (F-2): sc-390351
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RUNX2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400183-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RUNX2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400183-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RUNX2 codifica o fator de transcrição 2 relacionado a runt (RUNX2), um regulador-mestre do comprometimento da linhagem de osteoblastos e da morfogênese esquelética, que se liga a elementos consensuais de RUNX para coordenar programas gênicos que controlam a produção de matriz extracelular e a mineralização. Ele integra sinais das vias BMP/TGF-β, Wnt/β-catenina, MAPK e hedgehog para regular a diferenciação, a progressão do ciclo celular e redes transcricionais em progenitores mesenquimais. A atividade de RUNX2 molda a cromatina e coopera com cofatores como o CBFB para induzir a expressão de genes osteogênicos, incluindo COL1A1, ALPL e BGLAP. A expressão ou função desregulada de RUNX2 está implicada em distúrbios esqueléticos do desenvolvimento, alterações da homeostase óssea e papéis dependentes do contexto na progressão tumoral e na metástase, por meio de efeitos sobre programas transcricionais associados à EMT e ao remodelamento da matriz.
RUNX2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RUNX2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RUNX2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RUNX2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RUNX2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.