RTP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426736

Visão geral

A proteína transportadora de receptores 4 (RTP4) é um membro da família RTP envolvido no tráfego intracelular e na expressão funcional de determinados receptores acoplados à proteína G (GPCRs), influenciando a maturação do receptor, sua localização na membrana e a responsividade aos sinais. Em camundongos, a expressão de Rtp4 é comumente associada a programas de genes estimulados por interferon e à sinalização da imunidade inata, vinculando-a à regulação de respostas antivirais e de estados transcricionais inflamatórios. Por meio de efeitos sobre o processamento de receptores e vias associadas ao sistema imune, a RTP4 pode moldar as respostas celulares a estímulos extracelulares e a ambientes ricos em citocinas. A desregulação da sinalização relacionada à RTP4 e a ativação da via de interferon são frequentemente estudadas em contextos como interações neuroimunes, modelos de infecção e fenótipos associados à inflamação.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RTP4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Rtp4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Rtp4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Rtp4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RTP4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Rtp4 para a investigação da sinalização de RTP4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Rtp4 críticos para a função RTP4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Rtp4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo RTP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo RTP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Rtp4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo RTP4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR RTP4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Rtp4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Rtp4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.